[1]孙凯,王伟,雷尚通,等.MicroRNA-221通过抑制CDKN1C/p57 表达促进结肠癌细胞增殖[J].南方医科大学学报,2011,(11):1885.
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MicroRNA-221通过抑制CDKN1C/p57 表达促进结肠癌细胞增殖()
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《南方医科大学学报》[ISSN:/CN:]

卷:
期数:
2011年11期
页码:
1885
栏目:
出版日期:
2011-11-15

文章信息/Info

作者:
孙凯王伟雷尚通吴承堂李国新
关键词:
关键词:结肠癌microRNA-221CDKN1C/p57增殖
摘要:
摘要:目的探讨microRNA-221(MIR221)对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响。方法常规培养人
结肠癌Caco2 细胞系,预先给予或不给予CDKN1C/p57 干扰性小RNA(anti-p57-siRNA)处理,再以脂质体分别转染
MIR221前体(pre-MIR221)或MIR221特异性抑制剂(anti-MIR221)寡核苷酸,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)
检测Caco2细胞中MIR221表达状况,运用半定量RT-PCR及Western-blot分析CDKN1C/p57 mRNA及蛋白表达状况,并通
过噻唑蓝(MTT)比色法观察细胞的增殖状态;构建pGL3-p57荧光素酶报告载体并与pre-MIR221或anti-MIR221共转染
Caco2细胞,检测转染细胞中荧光素酶活性变化。结果Caco2细胞转染pre-MIR221后,CDKN1C/p57蛋白表达水平下降,
细胞增殖显著(P<0.01);而anti-MIR221 可上调CDKN1C/p57 蛋白表达继而抑制细胞增殖,且此种抑制作用可被
anti-p57-siRNA逆转,说明此种抑制效应确由CDKN1C/p57所介导;在转染重组有CDKN1C/p57基因3’-UTR片段的荧光
素酶报告载体的Caco2细胞中,共转染pre-MIR221后荧光素酶活性下降,而共转染anti-MIR221后荧光素酶活性增高,差异
均具有统计学意义(P<0.01)。结论MIR221可通过与CDKN1C/p57 mRNA 3’-UTR区域结合使结肠癌细胞中CDKN1C/
p57蛋白表达下降而促进肿瘤增殖;anti-MIR221则可通过上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖而发挥抗瘤效应。
更新日期/Last Update: 1900-01-01